如何保证定制抗体的特异性?

桃子 2024-11-17 16:00:37
最佳回答
抗体说白了 就 是能够特异性的识别空间结构所形成的抗原决定簇,那么 就 要考虑 你 所选择的基因片段能否符合抗原决定簇的要求。所以这个时候特异性尤为重要。为选择好的抗原决定簇,应符合以下三点:1.亲水性:大部分抗原决定簇是亲水性的;2.处于结构表 面 :大部分抗体只与蛋白质表 面 部分结合;3.有弹性:许多已知的抗原决定簇是在自由活动区域。所以一般来说蛋白质的n端及c端是很好的抗原决定簇区域。抗原性与 免 疫原性单独的抗原决定簇是不能产生 免 疫反应, 它 只有抗原性但没有 免 疫原性,为使 它 能具有 免 疫原性, 它 必须偶联在载体蛋白 上 。抗原决定簇的预测对每个氨基酸的表 面 可接触性(surface accessibility)、亲水性(hydrophilicity)和弹性(flexibility)进行计算可以大体 推 算出抗原决定簇区域,抗原决定簇区域应综合以 上 三个特点。目前市 面 上 有几个 专 业测定软件满足需要:如macvestor , protean , gcg等。不过刚刚开始自己制备抗体的话,建议还是找一 家 经验丰富的公司,看看别人在抗体制备这个方向主要的关注方向是哪些,不明白的地方还可以做详细的咨询。 我 们实验室长期合作的是美国的一 家 公司名为abclonal, 他 们的服务很到位,每一步 都 会为 我 耐心解答,建议可以试试。 20210311
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