医学检验,aptt、t t、pt、分别是用什么检测的?

TS婚礼视频定制 2024-06-24 01:14:36
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凝血功能套餐不止pt、tt、aptt还有fib有些大医院还要加一项国际敏感度指数(international sensitivity index,**i),以确pt的标准化。测定方法有很多:手工法,半自动,全自动,所需方法还要和当下条件相符才行,有专卖试剂的厂家,像亚中啊,金域啊,多得很,有官方网址,百度上可以查到的~以下所说,仅供参考: 凝血酶原时间(pt)的推荐方法 [原理] 将组织凝血活酶(主要含组织因子和脂质)和钙离子,加到枸橼酸抗凝血浆中,在37℃保温,测定血浆凝固时间,即为pt。pt主要用于筛选检测外源凝血系统的因子ⅶ、ⅱ、ⅴ、ⅹ和相关因子的抑制物的试验。 [标本来集和处理] 1、标本采集:用硅化或塑料注射器抽取空腹静脉血,按9:1比例加入含0.109mol/l的枸橼酸钠抗凝剂的硅化或塑料试管中,轻轻混合均匀。 2、标本处理:以2000~2500g,离心15分钟,分离乏血小板血浆,并在24小时内完成试验。 3、正常对照血浆:选择正常健康男性和女性各lo名以上,年龄在18~45岁。但不能是妊娠、月经期、哺乳期和口服避孕药的妇女,采取的血浆冰冻干燥保存或-80℃保存。 [试剂] 1、抗凝剂:109mmol/l枸橼酸钠液(相当于含二分子结晶水的枸橼酸钠32g/l)。 2、凝血活酶试剂:市售商品,应标有**i、批号及有效期。冻干者应按说明书加指定的缓冲稀释剂复溶。 3、氯化钙(cacl2)溶液:为25mmol/l。(目前有些商品试剂已将凝血活酶液与氯化钙液混合好,可不必另配cacl2液)。 4、质控物:正常及异常对照血浆 5、配制试剂用水必须符合1级纯水的标准。 [仪器] 1、手工法:秒表,保持37℃±1℃的恒温水浴箱或电热块。水深能浸试管3cm以上,表面无划痕的10×mm拭管。经标准的0.1ml移液管。经校正的秒表。 2、仪器法:各种自动或半自动血凝仪,严格按说明书操作。 [操作步骤] 1、手工法 (1)测定温度36.5~38.5℃,上述各试剂及被测血浆,均应预温至此一温度,但凝血活酶试剂预温不可超过30分钟,血浆预温一般不宜超过10分钟。 (2)所用试管及加样器等接触血浆的器具均为塑料或硅化玻璃管。 (3)吸取枸橼酸抗凝血浆0.1ml,加入一小试管中:加入凝血活酶试剂0.1ml混匀后置37℃水浴中。再加入25mmol/l cacl2液0.1ml,(也可先将凝血活酶试剂与cacl2溶液等量混合,加入0.2ml)。立即混匀并开动秒表:试管仍浸于水浴中,至约10秒钟时,自水浴中取出,在纱布上迅速擦去试管外水滴,在明亮处不断倾斜试管,在流动状态下观察有无纤维蛋白形成。一旦见到纤维蛋白(同时将出现液体流动减慢),立即停表,记录时间。每次测定二管,按平均数报告。本试验的最后混合液其ph应为7.2~7.3,大部分商品凝血活酶试剂均用含缓冲液的溶液配制。 (4)每批均同时做正常和异常对照,方法应与测定标本完全相同。 [报告方式] 1、以pt的秒(s)数报告(最接近的0.5秒) 2、以患者血浆(s)/正常对照pt(s)的比率(prt)报告。 3、在口服华法令类抗凝药物治疗监控时,应报告国际正常化比率(inr)。大部分自动化仪器可根据所测的ptr和凝血活酶试剂的**i,自动算出inr。手工法可根据下列公式,用一计算器直接计算: poller设计了一个简便的列线图,在取得ptr和**i值后,即可从图上直接查找出inr值,十分便利,国内已有介绍。 icsh规定,不再用稀释曲线或百分比(活动度)报告。 [参考值] 因仪器/试剂不同,会得出不同结果,故很难统一规定参考值。各实验室应根据自己的仪器、试剂等条件,自行测定一批健康人,建立参考值。此后至少每年或当条件有变化时,根据新的条件,重新建立。参考值pt测定的一切条件均应与患者血浆pt测定相同(包括采血、容器、抗凝剂等)。健康供血者应选至少20个18~55岁的男性和非妊娠、月经期女性,不可服药,在平静休息状态采血、以减少个体差异(有条件时,可测一批老年人和小儿,分开统计)。同时应分开几天采血和测定,以减少天间差异。测定结果经统计学处理,计算标准差:以两个标准差(2sd)或95%可信限作为参考范围。对于三个标准差是正常还是异常,需结合具体情况进行评估。从统计学上讲,其中有些人是正常的。用以上标准,病人(pt异常)则很少会遗漏。 三、活化部分凝血活酶时间(aptt)的标准化 (一)活化部分凝血活酶时间(aptt)的标准化 aptt是检测内源凝血系统诸凝血因子缺陷和相关抑制物的筛选试验,也是当前用于凝血因子、肝素抗凝治疗以及狼疮抗凝物质检测的主要手段。 与pt测定一样,不同的部分凝血活酶、不同的活化剂和不同的激活时间对各种凝血因子缺陷、对肝素和对狼疮抗凝物质的敏感性相差很大。例如,检测aptt的试剂中,所用活化剂(白陶土、硅藻土、鞣花酸)不同,他们对检测肝素、狼疮抗凝物质和因子ⅷ、ⅸ的敏感性不同。 迄今,icsh和icth尚未有aptt检测方法标准化或试剂标准化的可行方案问世,仅nccls于1992年,提出一个编号为h29-t的暂行方案。 (二)活化的部分凝血活酶时间(aptt)的推荐方法 [原理] 将一种磷脂和激活剂加到血浆中,经过孵育后,加入适当浓度的钙离子。其纤维蛋白凝块形成的时间(以秒计),即为aptt。本法主要用于过筛测定内源途径凝血因子的缺陷,如因子ⅶ、ⅺ、ⅷ、ⅸ、激肽释放酶原(pk)、高分子量激肽原(hmwk)以及纤维蛋白原等。同时也用于上述因子的抑制物测定、肝素治疗的监测以及狼疮抗凝因子的检查。 [仪器] 本实验所用仪器、设备(包括采血、贮血容器、加样装置和标本的处理等)以及对它们的要求完全与pt相同。pt所用自动化仪器同样适于本实验。 [试剂] 1、部分凝血活酶试剂:由商品供应。一般已与檄活剂按比例配在一起(或分开配制)常用的激活剂由硅藻土(商品名celite)、白陶土、二氧化硅微粒、鞣化酸(ellagic acid)或其它可用的激活剂,由厂方配套供应。 aptt试剂/仪器结合,应能使因子ⅷ、ⅸ或ⅺ活性低于0.3μ/ml(或<30%)的血浆,出现异常延长的结果。 2、氯化钙溶液(25mmol/l)以及其它试剂与pt所用者相同。 [操作步骤] 1、样品的采取、贮存、输送与pt测定相同。注意,应用清洁的塑料或硅化玻璃采血器采血及贮血。 2、标本(去血小板的血浆)的制备与pt相同。注意、应用去血小板血浆测定。 3、水浴箱或电热板的温度为37℃±1℃,要经常检查是否正确。 4、接触活化时间:加激活剂活化因子ⅻ的时间要保持一致;各仪器和试剂生产厂家的规定可能不一样,应严格按说明书要求进行。手工操作时,应用秒表或类似的定时装置计时。 5、操作:预温(不超过30分钟)aptt试剂一份与预温(不超过10分钟)的侍测血浆一份混合,立即开动秒表计时;至规定的接触活化时间终点时,加人预温37℃的cacl2液一份,混匀,同时开动秒表。至出现血浆凝固时,停表,记录血浆凝固时间(以秒计)。手工测定时应同时测定两管,按平均数报告。一些精密度已有很大改进的自动或半自动凝血仪,如果有适当的质控标准也可只测定一次。应同时测定正常和异常对照血浆。 不好意思tt着实没找到,不过联系到权威厂家,应该就不用自己去找了~ 20210311
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